@PhdThesis{diss_mods_00001866, author = {Weingartz, Ute}, title = {Exogene Expression von CD70 auf humanen Dendritischen Zellen mittels Elektroporation zur Herstellung einer verbesserten Tumorvakzine}, year = {2007}, publisher = {Christian-Albrechts-Universit{\"a}t zu Kiel}, address = {Kiel}, keywords = {CD70; Elektroporation; Dendritische Zellen; Transfektionseffizienz; Th1-Polarisation; Tumorvakzine; Feldst{\"a}rke; Pulszeit}, abstract = {CD70 geh{\"o}rt neben CD40 zur Gruppe der TNR/TNFR-Ligandenfamilie, die auf maturen Dendritischen Zellen (DC) exprimiert werden. Die CD70-Expression ist streng reguliert und erfolgt nicht auf zytokinmaturierten maturen DC. Es stellte sich die Frage, ob durch die Elektroporation von CD70-mRNA in zytokinmaturierte humanen DC und nachfolgende Kultivierung mit autologen T-Zellen die Induktion einer Th1-Antwort induziert werden kann. Durch sukzessiver Optimierung der Elektroporationsparameter Feldst{\"a}rke und Pulszeit konnten DC mit einer Transfektionsrate von 73,0{\%} {\textpm} 1,3{\%} und einer Viabilit{\"a}t von 83,1{\%} {\textpm} 3,9{\%} transfiziert werden. Die Transfektionseffizienz betrug hierbei 33,3{\%} 4,8{\%}. Eine Herunterregulation der Oberfl{\"a}chenmolek{\"u}le CD40, CD83, CD86 sowie MHCII auf maturen DC wurde nach Elektroporation nicht beobachtet. Die Blockierung von CD70 mit anti-CD70mAK f{\"u}hrte zu einer starken Abnahme der IFN-Sekretion aus autologen CD4-T-Zellen. Die bereits maturierten DC sezernierten nach kognitivem Kontakt zu autologen CD4-T-Zellen die Zytokine IL-12p70 und zu einem gr{\"o}{\ss}eren Teil IL-10, und waren daher Th2-polarisierend. Erstmals konnte gezeigt werden, dass humane Dendritische Zellen, die mit autologen T-Zellen in Anwesenheit des Antigens SEB kultiviert wurden, bereits nach 24 Stunden und abh{\"a}ngig vom Maturationsgrad der eingesetzten DC im hohen Ma{\ss}e endogenes CD70 exprimieren. Die vorliegende Arbeit unterstreicht den Einfluss von CD70 auf die Th1-Polarisation, und liefert neben einem optimierten Elektroporationsprotokoll zur Antigenbeladung von DC neue Anhaltspunkte f{\"u}r die Entwicklung einer verbesserten DC-basierten Tumorvakzine.}, url = {https://macau.uni-kiel.de/receive/diss_mods_00001866}, file = {:https://macau.uni-kiel.de/servlets/MCRFileNodeServlet/dissertation_derivate_00001866/d1866.pdf:PDF}, language = {de} }