@PhdThesis{diss_mods_00013621,
  author = 	{Struck, Birte},
  title = 	{Die TGF-{\ss}1-induzierte L1CAM-Expression in intestinalen Epithelzellen: Untersuchungen zu beteiligten Signalwegen und zellul{\"a}ren Auswirkungen},
  year = 	{2013},
  publisher = 	{Christian-Albrechts-Universit{\"a}t zu Kiel},
  address = 	{Kiel},
  keywords = 	{TGF-{\ss}1; L1CAM; intestinale Epithelzellen},
  abstract = 	{In vielen Geweben stellt die chronische Entz{\"u}ndung einen Risikofaktor f{\"u}r die Entwicklung
von Krebserkrankungen dar. Und auch die Entstehung eines kolorektalen Karzinoms (CRC)
wird durch eine langj{\"a}hrige Kolitis, wie sie im Rahmen von chronisch entz{\"u}ndlichen
Darmerkrankungen vorkommt, beg{\"u}nstigt.
Das Adh{\"a}sionsmolek{\"u}l L1CAM (CD171) konnte in verschiedenen Tumorentit{\"a}ten
nachgewiesen werden und vermittelt in diesen Tumoren u.a. Chemoresistenz und eine erh{\"o}hte
Migrationsf{\"a}higkeit der Tumorzellen. Auch in CRCs konnte eine erh{\"o}hte L1CAM-Expression
nachgewiesen werden, wobei diese einherging mit fr{\"u}hzeitiger Metastasierung und einem
deutlich verschlechterten Gesamt{\"u}berleben der Patienten. Aus Untersuchungen an
chronischen Pankreatitiden ist bekannt, dass L1CAM bereits unter entz{\"u}ndlichen
Bedingungen in nicht malignen Epithelzellen exprimiert werden kann.
Ziel dieser Arbeit war es zu {\"u}berpr{\"u}fen, ob L1CAM auch in intestinalen Epithelzellen
induziert werden kann und {\"u}ber welche zellul{\"a}ren Mechanismen die L1CAM-Expression
dabei vermittelt wird. Au{\ss}erdem sollte untersucht werden, ob L1CAM in den nicht malignen
intestinalen Epithelzellen Eigenschaften vermittelt, die die maligne Entartung dieser Zellen
beg{\"u}nstigen k{\"o}nnten.
Die Versuche dieser Arbeit wurden in vitro mit der nicht tumorigenen intestinalen
Epithelzellline NCM460 durchgef{\"u}hrt. Da sich die Darmschleimhaut von Patienten, die an
einer chronisch entz{\"u}ndlichen Darmerkrankung leiden, unter anderem durch erh{\"o}hte Spiegel
von Transforming Growth Factor {\ss}1 (TGF-{\ss}1) auszeichnet, wurde zun{\"a}chst untersucht, ob
die Stimulation der NCM460-Zellen mit TGF-{\ss}1 zur Hochregulation von L1CAM in den
Zellen f{\"u}hrt. Nachdem dies best{\"a}tigt werden konnte, wurde weiterhin gezeigt, dass TGF-{\ss}1
neben der Induktion der L1CAM-Expression bereits nach 24 Stunden zu morphologischen
Ver{\"a}nderungen in den NCM460-Zellen f{\"u}hrt, wie sie im Rahmen der epithelialen
mesenchymalen Transition (EMT) beobachtet werden. Eine vermehrte Expression von
Vimentin oder eine verminderte Expression von E-Cadherin, zwei weitere EMT-assoziierte
Ver{\"a}nderungen, lie{\ss}en sich nach 24- bzw. 48-st{\"u}ndiger Stimulation mit TGF-{\ss}1 nicht
nachweisen. Desweiteren konnte gezeigt werden, dass der durch TGF-{\ss}1 aktivierte Smad-
Signalweg nicht an der L1CAM-Expression in NCM460-Zellen beteiligt ist. Dagegen konnte
76
eine Beteiligung des ebenfalls durch TGF-{\ss}1 aktivierten JNK-Signalweges (c-Jun n-terminale
Kinase) an der L1CAM-Expression nachgewiesen werden. Infolge der Aktivierung von JNK
kam es zur Induktion des Transkriptionsfaktors Slug und zu dessen Bindung an zwei m{\"o}gliche
Slug-Bindungsstellen im L1CAM-Promoter. Dar{\"u}ber hinaus konnte mit Luziferase-Assays
gezeigt werden, dass die Bindung von Slug an beide oder nur an eine der beiden
Bindungsstellen notwendig ist, damit es zur Aktivierung des L1CAM-Promoters kommt.
Es konnte ferner gezeigt werden, dass L1CAM zur Apoptoseresistenz in den NCM460-Zellen
gegen{\"u}ber der Stimulation mit dem Todesliganden TRAIL (Tumor necrosis factor related
apoptosis inducing ligand) und dem Zytostatikum Irinotecan beitr{\"a}gt. Dar{\"u}ber hinaus erh{\"o}hte
die Expression von L1CAM deutlich die Migrationsf{\"a}higkeit von NCM460-Zellen.
Die Ergebnisse dieser Arbeit zeigen, dass L1CAM nicht nur in manifesten CRC, sondern nach
Stimulation mit TGF-{\ss}1 bereits in nicht malignen intestinalen Epithelzellen exprimiert wird.
Durch die L1CAM-Expression erlangen die intestinalen Epithelzellen einen
apoptoseresistenten und promigratorischen Ph{\"a}notyp und damit einen {\"U}berlebensvorteil, der
die Entstehung eines CRC aus diesen Zellen beg{\"u}nstigen k{\"o}nnte.
Die TGF-{\ss}1-induzierte L1CAM-Expression k{\"o}nnte daher ein Mechanismus sein, {\"u}ber den es
im Rahmen einer chronisch entz{\"u}ndlichen Darmerkrankung zur Entstehung eines Karzinoms
kommt.},
  url = 	{https://macau.uni-kiel.de/receive/diss_mods_00013621},
  file = 	{:https://macau.uni-kiel.de/servlets/MCRFileNodeServlet/dissertation_derivate_00005185/doktorarbeit_b._struck.pdf:PDF},
  language = 	{de}
}