@PhdThesis{diss_mods_00023897,
  author = 	{Klawitter, Jan},
  title = 	{Charakterisierung neuer Substrate der Aspartatprotease Cathepsin D nach Stimulation des TNF-Rezeptors 1},
  year = 	{2018},
  publisher = 	{Christian-Albrechts-Universit{\"a}t zu Kiel},
  address = 	{Kiel},
  keywords = 	{Apoptose; TNFR1; Cathepsin; D HSP90},
  abstract = 	{Apoptose  ist durch eine Vielzahl  von externen und internen Stimuli ausl{\"o}sbar. Im  Bereich externer Stimuli f{\"u}hrt eine Bindung des Liganden Tumornekrosefaktor alpha (TNF) an seinen spezifischen Rezeptor TNFR1 auf der Oberfl{\"a}che von Zellen der U937-Zelllinie zur Rezeptorinternalisierung und weiter zu einer Fusion als Rezeptosom mit dem MVB. Nach Aktivierung spaltet die Aspartatprotease  Cathepsin D beispielsweise das mitochondriale Protein bid in seine trunkierte Form tbid. {\"U}ber Cytochrom-c-Freisetzung und  sich anschlie{\ss}ende Apoptosombildung wird der intrinsische Weg der Apoptose transduziert. Die Zielsetzung der vorliegenden Arbeit besteht in der Charakterisierung neuer Substrate der Aspartatprotease Cathepsin D.
Zellen der humanen histiozyt{\"a}ren U937-Zelllinie wurden nach Vorabeiten an Cathepsin D-defizienten MEF-Zellen exogen mit TNF stimuliert. Dabei zeigte sich f{\"u}r das Hitzeschockprotein HSP90 ein Aufkommen massenspektrometrisch charakterisierter Spaltfragmente. Das Aufkommen dieser Fragmente war nach Anwendung des Aspartatproteaseinhibitors Pepstatin A reversierbar.  F{\"u}r das Chaperonin TCP1 alpha wurde eine vollst{\"a}ndige Degradation angenommen, da keine Spaltfragmente entstanden waren. Pepstatin A f{\"u}hrte hier  zu keiner signifikanten Inhibition der Degradation. Versuche, die Proteinexpression durch Transfektion von  U937-Zellen mit siRNA und shRNA zu inhibieren gelangen nicht. Hierzu wurde abschlie{\ss}end ein CRISPR/Cas9- Plasmid verwendet, wodurch eine stabile Transfektion erm{\"o}glicht werden konnte.},
  url = 	{https://macau.uni-kiel.de/receive/diss_mods_00023897},
  file = 	{:https://macau.uni-kiel.de/servlets/MCRFileNodeServlet/dissertation_derivate_00007898/Dissertation_Klawitter_CTSD.pdf:PDF},
  language = 	{de}
}